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高效液相色谱仪通常操作使用步骤和使用常见问题

更新时间：2025-01-03

高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理，主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。

　　高效液相色谱仪通常操作使用步骤和使用常见问题：

　　1.开机按溶剂输液泵上的power键，待自检完毕后开始进行操作。

　　2.排气

　　逆时针旋转排气阀（不可超过180°）,打开排气阀，按purge键排气泡，在此期间流动相连续流出并且无气泡；按purge键，泵停止，将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底，关闭排液阀

　　3.冲流动相

　　按Pump键，泵启动，观察屏幕上压力显示，压力上升平稳后，继续按上述方法升高流速，使流速上升到实验需要的流速。

　　4.进样

　　打开检测器，调节波长为实验需要的波长；打开工作站，查看基线，待基线走平后，进样。

　　5.使用后维护

　　6.水或含水甲醇溶液冲洗

　　6.1 水或含水甲醇溶液冲洗

　　使用结束后，将流速降到0.1 ml/min，按Pump键，泵停止。换下流动相，换上已抽滤并超声过的纯净水或含水甲醇溶液。按Pump键，泵启动，观察屏幕上压力显示，压力上升平稳后，继续按上述方法升高流速。如流动相含有无机盐，必须保证足够的冲洗时间。

　　6.2甲醇溶液冲洗

　　换上已抽滤并超声过的甲醇溶液，按3.1的操作进行封柱处理。

　　7 关机

　　按Pump键，关闭泵；关闭桌面在线工作站；按Power键关闭LC-10ATvp。

　　8.注意事项

　　8.1 不能使用浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亚砜等作为流动相。

　　8.2 流动相溶剂选择H

　　8.3 流动相溶剂必须进行脱气。若不脱气则在溶剂混合时或压力、温度变化时容易产生气泡，会引起泵的误动作和生产检测器信号噪音。

　　8.4 以硅胶作载体的化学键合填充剂的稳定性受流动相pH值的影响，使用时应详细阅读该柱的说明书，在规定的pH值范围内使用。使用时，可在泵与进样器之间连接一硅胶柱，以保护分析柱。当使用高PH或含盐的流动相时，尽可能缩短使用时间，用后立即冲洗。

　　8.5 分析结束后，从色谱流路系统，泵、进样器、色谱柱至检测器流通池，均应充分冲洗，特别是含盐的流动相，更应注意先用水、再用含水甲醇溶液充分冲洗。如发现严重故障，应与厂家联系维修。

　　8.6 请在使用前充分阅读作业指导书，不得擅自拆卸仪器的零部件。

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